Նոր Coronavirus (SARS-Cov-2) նուկլեինաթթվի հայտնաբերման հավաքածու
New Cօրոnavirus(SARS-Cov-2) Nucleic Acid Detection Kit
(Fluհանքաքարscent RT-PCR Probe Method) Product Manual
【Product name 】Նոր Coronavirus (SARS-Cov-2) նուկլեինաթթվի հայտնաբերման հավաքածու (լյումինեսցենտ RT-PCR զոնդավորման մեթոդ)
【Packaging specեթեcations 】25 Թեստեր/Հավաքածու
【Intended usտարիքը】
Այս հավաքածուն օգտագործվում է նոր կորոնավիրուսից նուկլեինաթթվի որակական հայտնաբերման համար քթի խոռոչի շվաբրերում, օրոֆարինգային (կոկորդի) շվաբրերում, քթի առջևի շվաբրերում, միջին պտտվող շվաբրերում, քթի լվացման և քթի ասպիրատներում այն անհատների մոտ, ովքեր իրենց բուժաշխատողի կողմից կասկածում են COVID19-ով: Նոր կորոնավիրուսի ORF1ab և N գեների հայտնաբերումը կարող է օգտագործվել նոր կորոնավիրուսային վարակի օժանդակ ախտորոշման և համաճարակաբանական մոնիտորինգի համար։
【Principles of the procedure 】
Այս փաթեթը նախատեսված է հատուկ TaqMan զոնդերի և հատուկ պրայմերների համար, որոնք նախատեսված են նոր կորոնավիրուսի (SARS-Cov-2) ORF1ab և N գեների հաջորդականությունների համար: PCR ռեակցիայի լուծույթը պարունակում է հատուկ պրայմերների և լյումինեսցենտային զոնդերի 3 հավաքածու՝ թիրախների հատուկ հայտնաբերման համար, և հատուկ պրայմերների և լյումինեսցենտային զոնդերի լրացուցիչ հավաքածուն օգտագործվում է որպես ներքին ստանդարտ հսկողություն հավաքածուի՝ էնդոգեն տնային տնտեսության գեների հայտնաբերման համար:
Փորձարկման սկզբունքն այն է, որ հատուկ լյումինեսցենտային զոնդը մարսվում և քայքայվում է Taq ֆերմենտի էկզոնուկլեազային ակտիվությամբ PCR ռեակցիայի ժամանակ, այնպես որ ռեպորտաժային լյումինեսցենտային խումբը և հանգցված լյումինեսցենտ խումբը բաժանվում են, որպեսզի ֆլյուորեսցենտային մոնիտորինգի համակարգը կարողանա ստանալ լյումինեսցենտ: ազդանշան, և այնուհետև PCR ուժեղացման հարստացման էֆեկտի միջոցով զոնդի ֆլյուորեսցենտային ազդանշանը հասնում է սահմանված շեմային արժեքի՝ Ct արժեքի (ցիկլի շեմ): Թիրախային ամպլիկոնի բացակայության դեպքում զոնդի ռեպորտաժային խումբը մոտ է մարման խմբին: Այս պահին տեղի է ունենում ֆլյուորեսցենտային ռեզոնանսային էներգիայի փոխանցում, և ռեպորտաժային խմբի ֆլյուորեսցենտը մարվում է մարման խմբի կողմից, այնպես որ լյումինեսցենտային ազդանշանը չի կարող հայտնաբերվել լյումինեսցենտային PCR գործիքով:
Փորձարկման ընթացքում ռեակտիվների օգտագործումը վերահսկելու համար հանդերձանքը հագեցած է դրական և բացասական հսկիչներով. դրական կոնտրոլը պարունակում է թիրախային տեղամասի ռեկոմբինանտ պլազմիդ, իսկ բացասական վերահսկողությունը թորած ջուրն է, որն օգտագործվում է շրջակա միջավայրի աղտոտվածությունը վերահսկելու համար: Թեստավորման ժամանակ խորհուրդ է տրվում միաժամանակ սահմանել դրական և բացասական հսկողություն:
【Main comպոնենts 】
| Cat. No. | BST-SARS-25 | BST-SARS-DR-25 | Կոմպոնները | |
| Նամe | Տեսակհաստատում | Քանակութ | Քանակութ | |
| Դրական վերահսկողություն | 180 մկլ/սրվակ | 1 | 1 | Արհեստականորեն կառուցված պլազմիդներ, Թորած ջուր |
| Բացասական վերահսկողություն | 180 մկլ/սրվակ | 1 | 1 | Թորած ջուր |
| SARS-Cov-2 խառնուրդ | 358,5 մկլ/սրվակ | 1 | / | Հատուկ այբբենարանի զույգեր, հատուկ հայտնաբերման լյումինեսցենտային զոնդեր, dNTPs, MgCl2, KCl, Tris-Hcl, թորած ջուր և այլն |
| Ֆերմենտային խառնուրդ | 16,5 մկլ/սրվակ | 1 | / | Taq ֆերմենտներ, հակադարձ տրանսկրիպտազ, UNG ֆերմենտներ և այլն: |
| SARS-Cov-2 խառնուրդ (լիոֆիլիզացված) | 25 թեստ/սրվակ | / | 1 | Հատուկ այբբենարանային զույգեր, հատուկ հայտնաբերման լյումինեսցենտային զոնդեր, dNTPs, Taq ֆերմենտներ, հակադարձ տրանսկրիպտազ, թորած ջուր և այլն: |
| 2x բուֆեր | 375 մկլ/սրվակ | / | 1 | MgCl2, KCl, Tris-Hcl, Թորած ջուր և այլն: |
Նշում:(1) Տարբեր փաթեթների բաղադրիչները չեն կարող խառնվել կամ փոխանակվել:
(2) Պատրաստեք ձեր սեփական ռեագենտը՝ նուկլեինաթթվի արդյունահանման հավաքածու:
【Storage conditions և expiration date 】
For BST-SARS-25:Տեղափոխում և պահպանում -20±5℃ երկար ժամանակ:
For BST-SARS-DR-25:Տեղափոխում սենյակային ջերմաստիճանում: Պահել -20±5℃ ջերմաստիճանում երկար ժամանակ:
Խուսափեք սառեցման-հալման կրկնվող ցիկլերից: Գործողության ժամկետը պայմանականորեն սահմանվել է 12 ամիս:
Տեսեք պիտակը արտադրության և օգտագործման ամսաթվի համար:
Առաջին բացումից հետո ռեագենտը կարող է պահվել -20±5°C ջերմաստիճանում ոչ ավելի, քան 1 ամիս կամ մինչև ռեագենտի ժամանակաշրջանի ավարտը, անկախ այն բանից, թե որ ամսաթիվն է առաջինը, խուսափելու սառեցման-հալման կրկնվող ցիկլերից և ռեակտիվների սառեցման քանակից: -հալեցման ցիկլերը չպետք է գերազանցեն 6 անգամ:
【Applicable instrument】ABI 7500, SLAN-96P, Roche-LightCycler-480:
【Sample requirements 】
1. Կիրառելի նմուշի տեսակը՝ արդյունահանված նուկլեինաթթվի լուծույթ:
2. Նմուշների պահպանում և տեղափոխում. Պահպանեք 6 ամիս ջերմաստիճանում -20±5℃: Սառեցրեք և հալեցրեք նմուշները ոչ ավելի, քան 6 անգամ:
【Testing metհոդ】
1.Nucleic acid extraction
Ընտրեք համապատասխան նուկլեինաթթվի արդյունահանման հավաքածու՝ վիրուսային նուկլեինաթթու արդյունահանման համար և հետևեք համապատասխան հավաքածուի հրահանգներին: Խորհուրդ է տրվում օգտագործել Yixin Bio-Tech (Guangzhou) Co., Ltd.-ի կողմից արտադրված նուկլեինաթթվի արդյունահանման և մաքրման հավաքածու կամ նուկլեինաթթվի մաքրման համարժեք հավաքածու:
2. Reaction ռեաժnt prepարաtion
2.1 For BST-SARS-25:
(1) Հեռացրեք SARS-Cov-2 Mix-ը և Enzyme Mix-ը, ամբողջովին հալեցրեք սենյակային ջերմաստիճանում և մանրակրկիտ խառնեք Vortex սարքի միջոցով և այնուհետև կարճ ժամանակով ցենտրիֆուգեք:
(2) 16,5 մլ ֆերմենտային խառնուրդ ավելացվել է 358,5 մլ SARS-Cov-2 խառնուրդին և մանրակրկիտ խառնվել՝ խառը ռեակցիայի լուծույթ ստանալու համար:
(3) Պատրաստեք մաքուր 0,2 մլ PCR օկտալ խողովակ և նշեք այն 15 մլ վերը նշված ռեակցիայի խառը լուծույթով մեկ ջրհորի մեջ:
(4) Ավելացրեք 15 մկլ մաքրված նուկլեինաթթվի լուծույթ, դրական հսկիչ և բացասական հսկողություն և զգուշորեն ծածկեք օկտալ խողովակի գլխարկը:
(5) Լավ խառնեք՝ գլխիվայր շրջելով և արագ ցենտրիֆուգեք՝ հեղուկը խողովակի ներքևում խտացնելու համար:
1
2.2 For BST-SARS-DR-25:
(1) Ավելացնել 375 մլ 2x բուֆեր SARS-Cov-2 Mix-ին ((Լիոֆիլիզացված)՝ ռեակցիոն խառնուրդը պատրաստելու համար: Մանրակրկիտ խառնեք պիպերթինգով և կարճ ժամանակով ցենտրիֆուգեք: (Հենց ռեակցիայի խառնուրդը պատրաստվի, խորհուրդ է տրվում պահել -20℃ ջերմաստիճանում: երկարաժամկետ պահեստավորում.)
(2) Պատրաստեք մաքուր 0,2 մլ PCR օկտալ խողովակ և նշեք այն 15 մկլ ռեակցիայի խառնուրդով մեկ ջրհորի մեջ:
(3) Ավելացրեք 15 մկլ մաքրված նուկլեինաթթվի լուծույթ, դրական կոնտրոլ և բացասական հսկողություն և զգուշորեն ծածկեք օկտալ խողովակի գլխարկը:
(4) Լավ խառնեք՝ շրջելով շրջելով և արագ ցենտրիֆուգեք՝ հեղուկը խողովակի ներքևում խտացնելու համար:
3. ՊՇՌ amplification (Գործողության կարգավորումների համար խնդրում ենք ծանոթանալ գործիքի ձեռնարկին:）
3. 1 Տեղադրեք PCR 8-խողովակը լյումինեսցենտային PCR գործիքի նմուշի խցիկում և դրեք փորձարկվող նմուշը, դրական կոնտրոլը և բացասական հսկիչը՝ ըստ բեռնման կարգի:
3.2 Լյումինեսցենտային հայտնաբերման ալիք.
(1) ORF1ab գենն ընտրում է FAM-ի հայտնաբերման ալիքը (Հաղորդող՝ FAM, մարող՝ չկա):
(2) N գենը ընտրում է VIC-ի հայտնաբերման ալիքը (Reporter: VIC, Quencher: None):
(3) Ներքին ստանդարտ գենը ընտրում է CY5-ի հայտնաբերման ալիքը (Հաղորդող՝ CY5, Quencher՝ Ոչ):
(4) Պասիվ հղումը սահմանված է ROX:
3.3 PCR ծրագրի պարամետրի կարգավորում.
| Քայլ | Ջերմաստիճանը (℃) | Ժամանակը | Ցիկլերի քանակը | |
| 1 | Հակադարձ արտագրման ռեակցիա | 50 | 15 րոպե | 1 |
| 2 | Taq ֆերմենտի ակտիվացում | 95 | 2,5 րոպե | 1 |
| 3 | Taq ֆերմենտի ակտիվացում | 93 | 10 վ | 43 |
| Կառուցման երկարացում և ֆլուորեսցենտային ձեռքբերում | 55 | 30 վ | ||
Կարգավորումից հետո պահեք ֆայլը և գործարկեք արձագանքման ծրագիրը։
4.Results analysis
Ծրագրի ավարտից հետո արդյունքները ավտոմատ կերպով պահպանվում են, և ուժեղացման կորը վերլուծվում է: Ուժեղացման կորը դրված է գործիքի լռելյայն շեմին:
【Explanation of test results 】
1. Որոշեք փորձի վավերականությունը. դրական հսկիչ FAM, VIC ալիքը պետք է ունենա տիպիկ ուժեղացման կոր, և Ct-ի արժեքը սովորաբար 34-ից փոքր է, բայց կարող է տատանվել տարբեր գործիքների շեմի տարբեր պարամետրերի պատճառով: Բացասական հսկիչ FAM, VIC ալիքը պետք է լինի ոչ ուժեղացված Ct: Պայմանավորվածություն է ձեռք բերվել, որ վերը նշված պահանջները պետք է կատարվեն միաժամանակ, հակառակ դեպքում այս թեստն անվավեր է:
2. Արդյունքի դատողություն
| FAM/VIC ալիք | Դատաստանի արդյունք |
| Ct＜37 | Նմուշի թեստը դրական է |
| 37≤Ct＜40 | Ուժեղացման կորը S-աձև է, և կասկածելի նմուշները պետք է նորից հետազոտվեն. եթե վերափորձաքննության արդյունքները համահունչ են, ապա այն գնահատվում է որպես դրական, հակառակ դեպքում՝ բացասական |
| Ct≥40 Կամ ուժեղացում չկա | Նմուշի թեստը բացասական է (կամ հավաքածուի հայտնաբերման ստորին սահմանից ցածր) |
Նշում. (1) Եթե և՛ FAM ալիքը, և՛ VIC ալիքը միաժամանակ դրական են, ապա SARS-Cov-2-ը որոշվում է որպես դրական:
(2) Եթե FAM ալիքը կամ VIC ալիքը դրական է, իսկ մյուս ալիքը բացասական է, ապա թեստը պետք է կրկնվի: Եթե այն միաժամանակ դրական է, ապա այն կգնահատվի որպես SARS-Cov-2 դրական, հակառակ դեպքում՝ որպես SARS-Cov-2 բացասական:
Հարակից ապրանքներ
-
COVID-19 IgM/IgG հակամարմինների հայտնաբերման հավաքածու
COVID-19 IgM/IgG հակամարմինների հայտնաբերման հավաքածու (Colloidal Gold Immunochromatography Method) Ապրանքի ձեռնարկ 【ԱՊՐԱՆՔԻ ԱՆՎԱՆՈՒՄ】COVID- 19 IgM/IgG Հակամարմինների հայտնաբերման հավաքածու (Colloidal Gold Immunochromatography, Test 【The Colloidal Gold Immunochromatography, s/Kit 【 Վերացական】 Նոր կորոնավիրուսները պատկանում են β սեռին։ COVID-19-ը սուր շնչառական վարակիչ հիվանդություն է։ Մարդիկ հիմնականում ենթակա են. Ներկայումս նոր կորոնավիրուսով վարակված հիվանդները հիմնական աղբյուրն են...
-
Նուկլեինաթթվի արդյունահանման կամ մաքրման հավաքածու
Նուկլեինաթթվի արդյունահանման կամ մաքրման հավաքածու կամ պահվում է -20℃ ջերմաստիճանում: Նմուշը պետք է տեղափոխվի 0℃ ոլորման միջոցով: Ներածություն Նուկլեինաթթվի արդյունահանման կամ մաքրման հավաքածուն (Magnetic Beads Method) նախատեսված է ՌՆԹ-ի և ԴՆԹ-ի ավտոմատացված մաքրման համար մարմնի հեղուկներից (օրինակ՝ շվաբրերից, պլազմայից, շիճուկից)՝ օգտագործելով նուկլեինաթթվի արդյունահանման ավտոմատացված գործիքներ: Մագնիսական մասնիկների տեխնոլոգիան ապահովում է բարձրորակ ԴՆԹ/ՌՆԹ, որը հարմար է ...
-
SARS-CoV-2 Հակագենի վերլուծության հավաքածու (Իմունոքրոմատոգր...
SARS-CoV-2 Հակագենի վերլուծության հավաքածու (Իմունոքրոմատոգրաֆիայի մեթոդ) Ապրանքի ձեռնարկ 【ԱՊՐԱՆՔԻ ԱՆՎԱՆՈՒՄ】SARS-CoV-2 Հակագենի վերլուծության հավաքածու (Իմունոքրոմատոգրաֆիայի մեթոդ) 【ՓԱԹԵԹՈՎԻ ՏԵՍԱԿԱՆՈՒԹՅՈՒՆՆԵՐ】 1 թեստը պատկանում է կորոնավիրուսի համարին։ COVID-19-ը սուր շնչառական վարակիչ հիվանդություն է։ Մարդիկ հիմնականում ենթակա են. Այս պահին նոր կորոնավիրուսով վարակված հիվանդները հիմնական...
-
SARS-CoV-2 Հակագենային վերլուծության հավաքածու
SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Immunochromatography Method) Ապրանքի ձեռնարկ 【ԱՊՐԱՆՔԻ ԱՆՎԱՆՈՒՄ】SARS-CoV-2 Antigen Assay Kit (Immunochromatography Method) 【PACKAGING SPECIFICATIONS】 1 Test/Test/Kit TRACT】 The Նոր կորոնավիրուսները պատկանում են β սեռին։ COVID-19-ը սուր շնչառական վարակիչ հիվանդություն է։ Մարդիկ հիմնականում ենթակա են. Ներկայումս վարակի հիմնական աղբյուրը նոր կորոնավիրուսով վարակված հիվանդներն են. ասիմպտոմատիկ վարակված մարդիկ...